Wat cellen transfectie en wat zijn de verschillende transfectiewerkwijzen?

celtransfectie

De werkwijze opzettelijk inbrengen van nucleïnezuren zoals deoxyribonucleïnezuur (DNA) of ribonucleïnezuur (RNA) in eukaryote cellen is bekend als Transfectie wanneer deze wordt uitgevoerd in zoogdiercel. Dezelfde procedure wordt aangeduid als transformatie, wanneer ze op bacteriën, planten, schimmels en algen worden uitgevoerd. Transfectie is zeer nuttig werkwijze gebruikt in de studie van genen en het formuleren strategieën met betrekking tot genen therapie.

De werkwijze van transfectie omvat normaliter opening tijdelijke openingen in het ontvangende celmembraan teneinde de acceptatie van materiaal mogelijk. Eiwitten of extrinsieke genetisch materiaal worden toegevoerd door deze openingen en de getransfecteerde cellen worden getrokken in de vreemde materialen fuseren met eigen materiaal. Aldus Transfectie met elektroporatie van calciumfosfaat of door integratie van kationogeen lipide bij het materiaal om liposomen te produceren die mengt met het celmembraan en de binnenkant deponeren hun lading.

Celtransfectie verwijst dus naar het gen delivery methode die introduceert vreemd DNA in de cel. Ziekten zoals hartziekten, aids, obesitas en kanker vereisen genetische behandelingen die kunnen worden ontwikkeld met behulp van transfectie methoden. Deze techniek wordt gebruikt door de wetenschappers om transgene dieren te creëren en ook om andere variëteiten van gezelschapsdieren, planten, bloemen en vruchten verhogen.

De aard van de cel transfectie kan ofwel voorbijgaand of stabiel. Wanneer de cel elimineert het ingebrachte vreemde DNA voorafgaand aan mitose of bij de mitose, wordt aangeduid als transiënte celtransfectie. Terwijl de stabiele transfectie cel verwijst naar het proces wanneer het geïntroduceerde DNA toegevoegd of vervangt een deel van het natieve DNA van de cel, binnenrijdt celkern. Dit type cel transfectie leidt tot de transformatie van de cel als gevolg waarvan er een duplicatie van het DNA veranderen tijdens mitose.

Andere transfectiewerkwijzen

Onderzoekers gemakkelijk genoeg induceren stabiele cel transfectie door gebruik te maken van chemische reagentia en zorgvuldig gestructureerde methodieken. Ze kunnen dus steeds een celkweek met een gewenste genetische verandering. Er zijn verschillende andere methoden waarmee de cel transfecties uitgevoerd. Deze bestaan ​​in wezen uit de biochemische cel transfectie werkwijzen zoals DEAE-dextran, calciumfosfaat en liposoom-gemedieerde transfectie methoden en Fysische celtransfectie werkwijzen zoals directe micro- injectie van materialen, electroporatie en biolistische levering deeltjes. Hier hebben we kort drie transfectie werkwijzen beschreven.

DEAE-Dextran werkwijze

Deze cel transfectie methode kan de binding van DNA aan het celmembraan en de ingang door endocytose. DNA in associatie met DEAE-Dextran levert complex binding aan het celoppervlak. Dit is de enige methode die niet kunnen worden gebruikt voor stabiele transfectie.

Electroporation

In deze cel transfectie methode hoogspanning elektrische schokken worden gebruikt om DNA in de cellen. Deze werkwijze leidt dus tot een toename van de permeabiliteit en de elektrische conductiviteit van het plasmamembraan van de cel als gevolg van een extern aangelegde elektrische schok. Deze cel transfectie methode kan worden gebruikt voor stabiele transfectie ook.

liposoom gemedieerde werkwijze

Dit celtransfectie methode maakt gebruik van kationische lipiden, die fysiek en chemisch zijn vergelijkbaar met de biologische lipiden. . Liposoomgemedieerde celtransfectie methoden kunnen DNA groter dan virussen
  dragen en zijn daarom veiliger dan virussen beschouwd;